Определение концентрации активных центров и каталитической константы рекомбинантной формиатдегидрогеназы из сои [Текст] / Е. Г. Романова [и др. ] // Вестник Московского университета. Сер. 2. Химия. - 2010. - N 3. - С. 156-159. - Библиогр.: с. 159 (5 назв. ) . - ISSN 0201-7385
Рубрики: Химия Анализ органических веществ Кл.слова (ненормированные): каталитическая константа -- концентрация активных центров ферментов -- мутантные ферменты -- флуоресценция свободной формиатдегидрогеназы -- формиатдегидрогеназа Аннотация: Проведен анализ структуры свободной формиатдегидрогеназы и связанной в тройной комплекс с NАD[+] и азид-ионом, который указывает на высокую вероятность эффективного тушения флуоресценции фермента при образовании этого комплекса. Получены спектры возбуждения и флуоресценции апо-фермента, показано, что флуоресценция фермента обусловлена остатками триптофана. Исследована зависимость тушения флуоресценции ФДГ от концентраций NАD[+] и азид-иона. С помощью данных зависимостей определены концентрации активных центров фермента и каталитическая константа рекомбинантной ФДГ из сои Glicine max. Доп.точки доступа: Романова, Е. Г.; Алексеева, А. А.; Пометун, Е. В.; Тишков, В. И. |
Гончаренко, К. В. Определение нанограммовых количеств формиатдегидрогеназы на мембране [Текст] / К. В. Гончаренко, С. С. Савин, В. И. Тишков // Вестник Московского университета. Сер. 2. Химия. - 2010. - N 3. - С. 160-163. - Библиогр.: с. 163 (6 назв. ) . - ISSN 0201-7385
Рубрики: Химия Анализ органических веществ Кл.слова (ненормированные): детекция формиатдегидрогеназы -- медиаторы -- мембраны -- методика определения нанограммовых количеств -- скрининг -- формиатдегидрогеназа -- формиатдегидрогеназа Рseudomonas sp. 101 Аннотация: Разработана методика определения нанограммовых количеств формиатдегидрогеназы на мембранах. Проверена оптимизация метода по типу и концентрации медиатора и по концентрации тетранитротетразолня синего. Установлено, что 5-метил-феназин-метасульфат является более эффективным медиатором по сравнению с феназинметасульфатом. В результате тестирования разных типов мембран для проведения анализа выбрана нитроцеллюлозная мембрана, обеспечивающая наименьший фон. Показано, что в оптимальных условиях чувствительность метода составляет 15 нг фермента в пробе. Доп.точки доступа: Савин, С. С.; Тишков, В. И. |